ESTUDIO MICROBIOLÓGICO DE LA ORINA UROCULTIVO

ESTUDIO MICROBIOLÓGICO DE LA ORINA

UROCULTIVO

El urocultivo es un examen de laboratorio para analizar si hay bacterias u otros microbios en una muestra de orina. Puede ser utilizado para buscar una infección en adultos y niños.

La etiología de las infecciones urinarias varia relativamente según se haya adquirido extra o intrahospitalariamente. En el primer caso, son casi siempre monomicrobianas, y en el segundo acostumbran a ser polimicrobianas.

Dentro de los bacilos gramnegativos predomina Escherichia coli, seguido de Proteus mirabilis y, con menor frecuencia, klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa y el resto de Enterobacteriaceae.

 Entre los cocos grampositivos destaca Streptococcus faecalis sobre Staphylococcus, que se representa en la misma proporción plasmo coagulasa positivo que negativo.

Las bacterias que se encuentran en la parte baja de la uretra y que pueden contaminar la orina sin producir, por lo general infecciones, pertenecen a los géneros: Lactobacillus, Bacillus y Corynebacterium.

                                                      

Bacteriuria significativa

Se refiere a la cantidad de bacterias que hay que encontrar en una orina para considerar que está infectada.

Hay multitud de estudios que indican que la mayoría de veces la bacteriuria se manifiesta con recuentos superiores al 1.000.000 de gérmenes por mililitro, y los limites aceptados en los estudios de la parte media de micción matinal de adultos y nuños son los siguientes: recuentos inferiores o iguales a 10.000 gérmenes por mililitro se considera como probable contaminación; cifras entre 10.000 y 100.000 por mililitro es dudoso y se debe repetir el estudio; recuentos superiores o iguales a 100.000 gérmenes por mililitro, corresponden a una probable infección.

Obtención de la muestra

Para la recolección de la orina preferiblemente procederá de la mitad de la primera micción de la mañana.

En el caso de las mujeres la técnica más adecuada para recoger orina cosiste en apartar los labios uretrales y lavar cuidadosamente la vulva con una esponja empapada en una solución jabonesa no bactericida. La operación se repite tres veces, y se eliminan los restos del lavado con una esponja seca, o, mejor aún, con una gasa estéril. La micción se efectúa manteniendo los labios separados, desechando la primera porción y recogiendo la central en un recipiente estéril.

En los hombres se retira el prepucio, y se lava el glande con una esponja empapada en una solución jabonesa no bactericida, durante tres veces consecutivas, después se seca con una gasa estéril y se recoge la parte intermedia de la micción en un recipiente estéril.

En niños pequeños se lava la región genital con una esponja empapada en detergente no bactericida, repitiendo la acción tres veces y secándolo con una gasa estéril. A continuación, se le sostiene boca abajo, frotándole los músculos paraespinales, lo cual, estimula sus deseos de orinar. Si no resulta, se coloca una bolsa estéril sobre los genitales del niño, esperando que la orina fluya espontáneamente. La bolsa se debe retirar tan pronto se haya producido la micción. Si esto no ocurre en una hora, se volverán a lavar los genitales, y se colocara de nuevo el recipiente.

En recién nacidos, en niños y en pacientes con dificultades para orinar, se recurre a la toma de muestras por punción suprapúbica, que debe efectuarla un especialista.

A menos que sea necesario, no es recomendable extraer la orina por sondaje o catéter, ya que fácilmente se puede provocar una infección.

Una vez tomada la muestra es preciso enviarla inmediatamente al laboratorio para su análisis. Si ha de tardar algún tiempo en llegar al lugar de su estudio, es necesario enviarla de forma refrigerada, ya que por ser la orina un excelente medio de cultivo, las bacterias podrían proliferar rápidamente, falseando los resultados.

Metodología

La orina remitida al laboratorio se homogeniza convenientemente y se divide en dos partes, una sirve para el estudio del sedimento y, la otra, para el urocultivo.

A partir del sedimento obtenido por centrifugación a 2.500 rpm, durante diez minutos, se hace una observación en fresco entre porta y cubre, que orienta sobre el número de microorganismos presentes en la orina, y un frotis, que se colorea por el método de Gram.

La siembra de orina, es decir, el urocultivo, debe hacerse de forma cuantitativa y cualitativa.

Urocultivo cuantitativo

El conocimiento del número de microorganismos presentes en una orina es de gran importancia para diagnosticar una infección urinaria. Son condiciones indispensables para que este estudio tenga valor, el que el análisis se efectué lo antes posible; y que el paciente no esté sometido a tratamiento antibiótico.

El método consiste en el cultivo de una o varias diluciones de orina, sembradas por diseminación en masa o en superficie. Para ello se prepara una dilución de orina al 1/50 añadiendo 0,1 ml de la muestra de orina a 4,9 ml de solución salina estéril. Esta dilución se siembra por cualquiera de las dos formas siguientes:

Ø  Por diseminación en masa. Se añade 0,1 ml de la disolución de 1/50 a un tubo que contiene agar Mueller Hinton fundido y temperatura a 47 °C, se homogeniza bien y se vierte en una placa Petri, dejándose solidificar.

Ø  Por diseminación en superficie. Se deposita 0,1 ml de la dilución 1/50 sobre la superficie de una placa de agar sangre, y se esparce en todas direcciones con una espátula de Digralsky o con varilla de cristal acostada.

En ambos casos, las placas se incuban a 37°C durante veinticuatro horas, después de lo cual, se cuenta el número de colonias por placa y se multiplica por el inverso de la dilución (x500). Esta cifra indica el número de gérmenes viables por mililitro de orina. 

Urocultivo cualitativo

Para el aislamiento de gérmenes de la orina, se utilizan sistemáticamente dos medios de cultivo, el agar MacConkey, o el agar eosina azul de metileno (EMB). Aunque ambos son específicos para Enterobacteriaceae, el ultimo permite el crecimiento discreto de enterococos.

Si la infección urinaria está producida por un microorganismo que por exigencias nutritivas no crezca o lo haga mal en agar MacConkey o EMB, para su determinación se partirá de las colonias crecidas en los medios de cultivo usados en el estudio cuantitativo (Cled, agar sangre).